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NRPB44 生物素琼脂糖凝胶FF

发布日期:2020-05-09 阅读次数:2000

品  名:生物素琼脂糖凝胶FF

英文名Biotin NUPharose Fast Flow, Biotin NUPharose FF

目录号NRPB44L、NRPB44S(预装柱)

规  格20 ml,100 ml,1L,1 ml预装柱,5 ml预装柱,特殊规格订制

运  输2 ~ 25℃,常压、避光

贮  存20%乙醇,2 ~ 8℃

保质期3年


相关介绍: 

  生物素琼脂糖凝胶FF是一种将D-生物素键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。该介质中的生物素配基能高度特异性亲和亲和素、链霉亲和素,亲和力非常高,可用于亲和素、链霉亲和素及其偶联物的固定化,固定化后的产品可应用于诊断检测,蛋白纯化等。也可直接用于削弱亲和力的亲和素、链霉亲和素的纯化。

技术指标:

基质

4%琼脂糖凝胶

配基

D-生物素

配基密度

≥2 μmol/ml

填料粒径

60~180 μm

最大流速

800 cm/h

推荐流速

50-100 cm/h

pH稳定性

pH 3~13

0.3 MPa

载量

≥30 mg r-SA/ml


使用方法:

1、色谱柱装填

(1)所有需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。

(2)在柱子下端加入蒸馏水,以除去柱子中的空气,关闭柱子出口,在柱内保留少量的蒸馏水。

(3)将琼脂糖凝胶连续倒入柱子时,要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降。

(4)柱压不超过0.3MPa,如果装柱系统中无法测柱压,则正常流速下填装。

(5)填装好的生物素琼脂糖凝胶FF柱用2-5个柱体积的结合缓冲溶液平衡,建议流速100cm/h,平衡后的柱子可以用于亲和素、链霉亲和素的固定化或纯化。

2、上样

(1)缓冲液选择:一般选用pH6-8的结合缓冲液,常用缓冲液有10-00mM 磷酸钠缓冲液、20-200mM Tris-HCl缓冲液等。在缓冲液中一般要加入0.15-0.5M的NaCl,以消除离子交换作用。在初次使用生物素琼脂糖凝胶FF时,推荐使用50mM PBS(50 mM NaH2PO4,0.5M NaCl,NaOH调节pH 7.4)作为结合缓冲液。

(2)样品处理:样品的缓冲液应与所选结合缓冲液一致。为保证缓冲液一致,可以在结合缓冲液中破碎细菌、或调解pH与结合缓冲液一致、或交换至结合缓冲液(常用方法有透析、超滤、脱盐柱换液等)、或用结合缓冲液稀释2-10倍等。样品上柱前应0.45μm过滤。

3、洗脱

(1)生物素琼脂糖凝胶FF如结合了亲和素、或链霉亲和素之后,由于亲和力非常高,通常很难洗脱,可作为固定相用于其他物质的检测或纯化,比如固定了链霉亲和素-抗原的融合蛋白可用于纯化对应的抗体。

(2)如结合了削弱亲和力的亲和素、或链霉亲和素,可在结合缓冲液中加入1-5mM的D-生物素作为洗脱缓冲液,通过竞争的方法洗脱,比如本足球买球的r-SA2、r-SA3、r-cSA3等产品均通过该法纯化获得。

4、除了柱层析以外,也可能通过孵育的方式固定亲和素、链霉亲和素。

5、在位清洗

(1)用于纯化时,多次使用后需要再生,本产品耐受一定的碱性,推荐使用2-5个柱体积的0.1M NaOH溶液反向清洗柱子,进行再生。

(2)其他方法,比如1-2M NaCl、70%乙醇、30%异丙醇等,也可用于该介质的再生。

导购指南

中文名

英文简称

货号

规格

产品描述

重力预装柱

生物素琼脂糖凝胶FF重力预装柱

Biotin NUPharose Fast Flow pre-packed column

NRPB44S-Z11

1*1mL

1支*1ml

NRPB44S-Z41

4*1mL

4支*1ml

NRPB44S-Z15

1*5mL

1支*5mL

NRPB44S-Z25

2*5mL

2支*5mL

AKTA中压预装柱

生物素琼脂糖凝胶FF中压预装柱

Biotin NUPharose Fast Flow pre-packed column

NRPB44S-Y11

1*1mL

1支*1ml

NRPB44S-Y41

4*1mL

4支*1ml

NRPB44S-Y15

1*5mL

1支*5mL

NRPB44S-Y25

2*5mL

2支*5mL

填料

生物素琼脂糖凝胶FF

Biotin NUPharose Fast Flow 

NRPB44L-10

10mL

1瓶*10ml

NRPB44L-20

20mL

1瓶*20ml

NRPB44L-100

100mL

1瓶*100ml

NRPB44L-500

500ml

1瓶*500ml

注:足球买球生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积

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