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NRPA19 重组牛肠激酶(组氨酸标签)(rbEK-His)

发布日期:2018-10-26 阅读次数:1612

品    名:重组牛肠激酶(组氨酸标签)(Recombinant Bovine Enterokinase, His-tag, rbEK-His)

目 录 号:NRPA19S/L

规    格:200 U(液体),1000 U(液体),100 μg,1 mg,特殊订制

产品形式:液体为1 U/μl rbEK-His, 50 mM Tris-HCl, 50%甘油, pH 8.0;冻干粉冻干前为50 mM Tris-HCl (pH 8.0)酶溶液

分 子 量:27.6 kDa(SDS-PAGE检测约为30 kDa)

等 电 点:5.72

比 活 性:≥40000 U/mg,即1 mg rbEK-His至少切割2000 mg融合蛋白。

纯    度:≥95%(SDS-PAGE检测)

A280nm(1 mg/mL):1.95

内 毒 素:≤5 EU/mg

来    源:大肠杆菌

保存条件:-20℃保存

有 效 期:3年

活性定义:25℃,反应缓冲液为50 mM Tris-HCl (pH 8.0),底物为50 μg 1 mg/ml含酶切位点的融合蛋白,16 h内切割95%的融合蛋白所需的酶量为1个酶活力单位(1 U)。


相关介绍:

肠激酶(EC 3.4.21.9)是一种丝氨酸蛋白水解酶,能高效专一地识别蛋白质中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在赖氨酸(Lys,K)的C端水解肽键,产生切割,在生物体内水解胰蛋白酶原转变为胰蛋白酶,由于肠激酶具有高度专一性和高效酶切特性,广泛应用于基因工程产品的开发。


天然肠激酶由1条115 kDa的重链和1条35 kDa的轻链组成,重链起锚定细胞膜的作用,轻链具有全酶完整的催化活性。本产品为牛肠激酶的轻链活性核心区域与组氨酸标签的融合蛋白,采用大肠杆菌分泌技术表达,与天然肠激酶相比,比活性更高。同时带有组氨酸标签,酶切后可用镍柱(NRPB07)去除样品中的rbEK-His,特别适用于基因工程融合蛋白的酶切。


注意事项:

1)一些试剂会影响酶的活性,如 >2 M Urea,>250 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1% SDS,>50 mM Imidazole,样品中如果含有这些成分,需要透析至50 mM Tris-HCl (pH 8.0);

2)磷酸盐会抑制肠激酶的活性,应避免使用磷酸盐缓冲液作为酶切体系;

3)溶解后放置在冰浴上并尽量马上使用;

4)若一次性用不完,请在使用前配制成母液并分装成小规格(保证一次试验的用量)保存在-65℃,避免反复冻融影响蛋白活性

5)避免使用强酸、强碱、强氧化剂、高浓度的有机溶剂等易引起蛋白质变性的试剂;

6)本产品仅限于科研使用。


图片27.jpg

M:蛋白质分子量标准

Lane 1:rbEK-His


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